Анализ ПЦР на Коронавирус COVID-19 (РНК SARS-CoV-2) — отзыв

Учась в медицинском университете я, конечно, понимала, что все мы военнообязанные, но никак не могла предполагать, что через несколько лет придется оказаться на передовой линии фронта, придется вести борьбу с опасным и коварным врагом. И это не то противостояние, когда ты видишь или слышишь надвигающуюся угрозу, когда можешь спрятаться от падающих снарядов, укрыться за баррикадами или притаиться в окопах. Опасность в новой реальности не видно, не слышно, невозможно уловить ее запах и предугадать с какой стороны произойдет нападение.

Новый коронавирус, пришедший из Китая, покоряет мир, уничтожает население, экономику и психику людей. После того, как все это закончится мир уже никогда не будет прежним, навсегда останется страх одиночества, но в то же время и боязнь скопления людей, близких контактов, страх остаться без средств к существованию, но в то же время опасение идти на работу, чтобы заработать на жизнь, ехать в общественном транспорте, страх остаться без необходимой медицинской помощи и ужас перед госпитализацией в стационар, который еще вчера не был инфекционных, а уже сегодня...

В самый разгар эпидемии коронавируса по долгу службы я ни на один день не прекращала свою работу и продолжала оказывать медицинскую помощь моим пациентам. Наше лечебное учреждение не перепрофилировали, мы работаем в прежнем режиме с некоторыми ограничениями и дополнительными предосторожностями.

В первое время, когда инфицированные коронавирусом COVID-19 начали появляться у нас в городе, никаких средств защиты, за исключением шапочки и маски, которые в общем-то всегда были в "мирное" время, нам не предоставляли. Посещение нашего лечебного учреждения пациентами было свободным, им не измеряли температуру на входе и уж тем более не требовали никаких справок об отсутствии инфекции, да и почти нигде тогда в городе не тестировали людей даже с явными признаками заболевания.

По мере распространения инфекции и увеличения числа выявленных вирус-положительных людей наше учреждение начали снабжать более серьезными индивидуальными средствами защиты для медицинского персонала, объем амбулаторной помощи был значительно сокращен, стационарной увеличен, а для госпитализации в стационар требовалось наличие документов об отсутствии коронавирусной инфекции. Для ускорения получения необходимых анализов лаборатория по тестированию была развернута прямо в стенах нашего лечебного учреждения - для выявления инфекции у пациентов, поступающих на стационарное лечение и регулярного тестирования медицинского персонала, который каждую минуту может столкнуться с вирусом не только на работе, но и по дороге на нее.

В общих случаях тестированию подлежат следующие категории граждан:

* если человек прибыл из эпидемиологически неблагополучных регионов за 14 дней до появления у него симптомов коронавируса;

* при наличии контактов за последние 14 дней с лицами, у которых был лабораторно выявлен COVID-19;

* при наличии контактов в течение этого же периода с лицами, находящимися под наблюдением по коронавирусу и которые впоследствии оказались инфицированными;

* если человеку был поставлен диагноз «пневмония»

Материалом для лабораторного исследования являются мазки из носоглотки и зева в амбулаторных условиях, а также промывные воды бронхов, полученные при бронхоскопии (бронхоальвеолярный лаваж) у тяжёлых пациентов с пневмонией.

С началом активного распространения инфекции сотрудников нашего лечебного учреждения начали регулярно тестировать.

Каждому сотруднику выдаётся набор из двух стерильных ватных палочек и маленькой пробирки с раствором, в которую должны быть помещены эти палочки после выполнения мазка. Каждой пробе присваивается порядковый номер, тестирование проводится в специализированной лаборатории анонимно, результаты нам сообщают уже на следующий день.

Методика забора материала для выявления коронавирусом COVID-19.

Одной стерильной ватной палочкой из набора необходимо произвести забор материала из полости носа, заведя палочку максимально глубоко, скользя по слизистой и немного вращая вокруг своей оси палочку.

Ощущения не самые приятные и даже несколько болезненные, однако именно глубокое введение тупфера позволяет качественно забрать биоматериал и выявить инфекцию при попадании в мазок даже небольшого числа вирусных частиц.

Второй стерильной ватной палочкой следует провести по поверхности миндалин, небных дужек и задней стенке глотки, также совершая вращательные движения.

Затем обе ватные палочки отламываются и помещаются в один контейнер с раствором, чтобы увеличить возможную концентрацию вирусных частиц, после чего он направляется в лабораторию.

В идеале забор материала должен производиться специально подготовленным человеком, оснащенным средствами индивидуальной защиты, знающим правила получения мазков. Это могут быть сотрудники поликлиники, диагностической лаборатории или Роспотребнадзора. Мне крайне удивительно слышать по телевизору, что тест на коронавирус могут доставить курьеры на дом, человек сам у себя возьмёт мазки и отдаст курьеру уже упакованный биоматериал для дальнейшего исследования. На мой взгляд это пустая трата денег и реальная возможность упустить время для получения истинного результата, ведь инфекция у человека может развиваться, а неправильный забор материала не позволит ее вовремя обнаружить.

Сам анализ тоже достаточно трудоемкий. Обнаружить вирусную РНК позволяет метод полимеразной цепной реакции, при котором объем генетического материала увеличивается многократно.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе).

В случае с коронавирусом COVID-19 ситуация осложняется тем, что для того, чтобы уловить увеличенное количество ДНК ее сначала нужно синтезировать на основе РНК вируса методом обратной транскрипции, что удлиняет и удорожает исследование, требует большого количества реактивов, инструментов и приборов.

ПЦР с обратной транскрипцией — используется для амплификации, выделения или идентификации известной последовательности из библиотеки РНК. Перед обычной ПЦР проводят на матрице мРНК синтез одноцепочечной молекулы ДНК с помощью ревертазы и получают одноцепочечную кДНК, которая используется в качестве матрицы для ПЦР.

От специалиста, проводящего исследование, требуется максимум внимательности, сосредоточенности, чтобы четко добавлять все необходимые для транскрипции реактивы и получить истинные результаты.

Несмотря на то, что наш стационар не является инфекционным, пациенты с положительными результатами встречаются все чаще. Некоторые из них не имеют ни малейшего симптома заболевания, другие же, при отрицательных результатах исследования мазков, имеют различной выраженности дыхательную недостаточность и характерную картину на компьютерной томографии грудной клетки.

К сожалению, это говорит том, что отрицательный анализ ПЦР на коронавирус не всегда означает отсутствие инфекции, однозначно о заболевании может говорить лишь комплексное обследование пациента.

Одна моя пациентка не имела никаких проявлений коронавирусной инфекции.

А вот у другого пациента для поиска генетического материала вируса пришлось брать на исследование промывные воды бронхов.

Никогда не знаешь инфицирован будет следующий пациент или абсолютно здоров, мы все каждый день ходим под невидимыми "пулями", никакие средства индивидуальной защиты не гарантируют полной безопасности, поэтому каждого очередного тестирования я жду с нетерпением, чтобы иметь хоть какую-то небольшую уверенность, что не принесу инфекцию своим близким. Дважды результаты всех сотрудников нашего отделения были отрицательными, и я надеюсь, что так будет продолжаться и дальше.

В заключении хочу сказать, что не стоит бояться сдавать тест на определение коронавируса, пусть это и не очень приятно, не знаешь как отреагируешь, если вдруг мазок окажется положительным, но неизвестность в разы хуже. Сейчас многие лаборатории предлагают выполнить этот анализ не только при посещении их офисов, но и на дому. Стоимость не высока, сроки исполнения от двух до пяти дней. В случае обнаружения в биоматериале вирусной РНК лечение можно будет начать как можно раньше, будет возможность оградить своих родственников от инфицирования. Отрицательный же анализ позволит спокойно дожидаться окончания борьбы с невидимым врагом в надежде на возврат к нормальной жизни.

.